分析型高效液相色譜儀是當(dāng)今化學(xué)與生物實(shí)驗(yàn)室中分離分析工具。它以其高分離效能、高靈敏度和廣泛應(yīng)用的特點(diǎn)，在藥物研發(fā)、食品安全、環(huán)境監(jiān)測(cè)等諸多領(lǐng)域發(fā)揮著關(guān)鍵作用。

一臺(tái)完整的分析型高效液相色譜儀是由幾個(gè)關(guān)鍵子系統(tǒng)精密協(xié)同工作的結(jié)果：

1.溶劑輸送系統(tǒng)：主要包括儲(chǔ)液器（用于貯存流動(dòng)相）、高壓輸液泵（核心部件，負(fù)責(zé)以高壓形式將流動(dòng)相連續(xù)不斷地打入系統(tǒng)）和脫氣裝置（用于去除流動(dòng)相中溶解的氣體，防止在檢測(cè)器中形成氣泡干擾檢測(cè)）。高性能的泵系統(tǒng)，如Agilent 1260 Infinity III Prime液相色譜系統(tǒng)所配備的，能提供精確而準(zhǔn)確的梯度性能，以及高達(dá)5 mL/min的流速和800 bar的壓力范圍。

2.進(jìn)樣系統(tǒng)：通常為自動(dòng)進(jìn)樣器，能將樣品溶液精確、重復(fù)地注入流路中，避免手動(dòng)進(jìn)樣帶來(lái)的誤差?，F(xiàn)代自動(dòng)進(jìn)樣器，如1260 Infinity III Multisampler，還具有多重清洗功能，能將交叉污染降至10 ppm以下。

3.分離系統(tǒng)：即色譜柱，是整個(gè)色譜系統(tǒng)的心臟。其內(nèi)部填充有微米級(jí)的高效微粒固定相（如硅膠或鍵合相硅膠），柱效可達(dá)每米5000塔板數(shù)以上。色譜柱的質(zhì)量?jī)?yōu)劣直接影響到分離的效果。

4.檢測(cè)系統(tǒng)：檢測(cè)器負(fù)責(zé)將色譜柱流出的組分轉(zhuǎn)變?yōu)榭蓽y(cè)量的電信號(hào)。常見(jiàn)的檢測(cè)器包括紫外-可見(jiàn)光檢測(cè)器（UV-Vis/DAD）、熒光檢測(cè)器（FLD）、示差折光檢測(cè)器（RID）和蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ELSD）等。選擇取決于被測(cè)物的性質(zhì)。

5.數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)：現(xiàn)代HPLC均配備色譜數(shù)據(jù)工作站（CDS），不僅用于采集、處理和報(bào)告數(shù)據(jù)，還能參與儀器的自動(dòng)控制和方法運(yùn)行，符合如21 CFR Part 11等法規(guī)遵從性要求。

性能特點(diǎn)：四大優(yōu)勢(shì)彰顯技術(shù)魅力：

•高壓：使用高壓泵輸送流動(dòng)相，系統(tǒng)壓力可達(dá)150–300 kg/cm²，這是實(shí)現(xiàn)高速和高效分離的前提。

•高速：分析速度顯著加快，流速通常在0.1–10.0 mL/min之間，分析一個(gè)樣品一般在15–30分鐘內(nèi)完成，有些甚至只需5分鐘。

•高效：由于使用了粒度更細(xì)、更均勻的固定相（如亞2µm填料），柱效大幅提高，塔板數(shù)可達(dá)每米5000以上，能在一根色譜柱中同時(shí)分離成分達(dá)100種。

•高靈敏度：現(xiàn)代檢測(cè)器靈敏度，紫外檢測(cè)器可達(dá)0.01ng，熒光和電化學(xué)檢測(cè)器甚至可達(dá)0.1pg級(jí)別，同時(shí)樣品消耗量很少。

此外，HPLC還具有分辨率高、色譜柱可反復(fù)使用以及樣品回收方便（樣品經(jīng)過(guò)色譜柱后通常不被破壞）等優(yōu)點(diǎn)。

應(yīng)用領(lǐng)域：

•制藥與生物醫(yī)藥：這是HPLC應(yīng)用泛和深入的領(lǐng)域。從藥物研發(fā)（鑒定藥物靶標(biāo)、純化生物活性物質(zhì)）、生產(chǎn)質(zhì)量控制（原料藥純度分析、制劑溶出度研究）到雜質(zhì)和降解產(chǎn)物分析，HPLC都是確保藥品安全有效的關(guān)鍵工具。在生物制藥領(lǐng)域，它還用于肽圖分析、抗體分析以及寡核苷酸鑒定和定量。

•食品科學(xué)：用于分析食品中的營(yíng)養(yǎng)成分（如蛋白質(zhì)、氨基酸、糖類、維生素）、食品添加劑（如甜味劑、防腐劑、著色劑）以及污染物（如霉菌毒素、農(nóng)藥殘留），保障食品安全和質(zhì)量。

•環(huán)境監(jiān)測(cè)：用于鑒定、監(jiān)測(cè)和定量分析水和土壤中的有機(jī)污染物，如多環(huán)芳烴(PAHs)、農(nóng)藥殘留、全氟和多氟烷基物質(zhì)(PFAS)等，為環(huán)境保護(hù)提供科學(xué)依據(jù)。

•臨床研究與法醫(yī)毒理學(xué)：臨床實(shí)驗(yàn)室利用HPLC分析復(fù)雜的生物液體（如血液、血漿、血清），以協(xié)助開(kāi)發(fā)靶向精準(zhǔn)藥物。法醫(yī)和毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)室則依靠其篩查、定量和確認(rèn)與調(diào)查及藥物濫用相關(guān)的物質(zhì)。

分析型高效液相色譜儀作為現(xiàn)代分析科學(xué)的支柱技術(shù)，其精密的分離能力、靈活的配置選項(xiàng)和廣泛的適用性，使其成為科學(xué)家手中解開(kāi)復(fù)雜物質(zhì)組成奧秘的鑰匙。隨著技術(shù)的不斷融合與創(chuàng)新，HPLC將繼續(xù)推動(dòng)科學(xué)研究和質(zhì)量控制的進(jìn)步，在各個(gè)領(lǐng)域發(fā)揮不可替代的作用。